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qpcr之hrm技术原理和应用
黄宝福

hrm
• high resolution melting curve高分辨率熔解 曲线 • hrm的主要原理是根据dna序列的长度、 gc含量以及碱基互补性差异,应用高分辨率 的熔解曲线对样品进行分析,其极高的温度 均一性和温度分辨率使分辨精度可以达到对 单个碱基差异的区分。

hrm技术优势
• 高通量 一次可同时检测多个样本 • 高灵敏度 hrm可以检测snp • 重复性好 pcr产物无需后续处理,实现闭管操作, 避免交叉污染 • 操作简便 只需设计pcr引物,进行pcr反应,无 需特异性探针和荧光标记,不受突变碱基位 点与类型 限制

hrm技术优势
• 成本低 相比传统snp/突变分析法和定量探针法,简化 了操作时间和步骤,降低了使用成本 • 适用范围广 可用于各种领域和不同标本 • 其它 只检测pcr样品中的荧光强度变化,不消耗任 何pcr样品,无污染,pcr产物可以用于下游分析 ,非常适合于测序前的snp预扫描筛查

hrm

hrm

hrm

hrm

hrm应用
• 基因的突变扫描 检测杂合子snp 区段/碱基缺失 前后重复 杂合子缺失 • hla基因组配型 器官移植hla配型 同胞之间hla基因型确定

hrm应用
• 等位基因频率分析 snp频率分析 • 物种、品种鉴定 微生物品种 物种快速鉴定 动植物品种鉴定 • 甲基化研究 甲基化位点筛查,甲基化程度分析 • 法医学鉴

向豆丁求助:有没有qpcr 作图?

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